毛細(xì)管電泳儀又稱高效毛細(xì)管電泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE),是一類以毛細(xì)管為分離通道、以高壓直流電場為驅(qū)動(dòng)力的新型液相分離技術(shù)。
毛細(xì)管電泳實(shí)際上包含電泳、色譜及其交叉內(nèi)容,它使分析化學(xué)得以從微升水平進(jìn)入納升水平,并使單細(xì)胞分析,乃至單分子分析成為可能。
雙電層是指兩相之間的分離表面由相對固定和游離的兩部分離子組成的與表面異號的離子層,凡是浸沒在液體中的界面都會產(chǎn)生雙電層。在毛細(xì)管電泳中,無論是帶電粒子的表面還是毛細(xì)管管壁的表面都有雙電層。
毛細(xì)管電泳實(shí)際上包含電泳、色譜及其交叉內(nèi)容,它使分析化學(xué)得以從微升水平進(jìn)入納升水平,并使單細(xì)胞分析,乃至單分子分析成為可能。長期困擾我們的生物大分子如蛋白質(zhì)的分離分析也因此有了新的轉(zhuǎn)機(jī)。
毛細(xì)管電泳通常使用內(nèi)徑為25-100 μm 的彈性(聚酰亞胺)涂層熔融石英管。
標(biāo)準(zhǔn)毛細(xì)管的外徑為375 μm,有些管的外徑為160 μm。
毛細(xì)管的特點(diǎn)是:容積小(一根100 cm×75 μm 管子的容積僅4.4 μL);側(cè)面/截面積比大,因而散熱快、可承受高電場(100-1000 V/cm);可使用自由溶液、凝膠等為支持介質(zhì);在溶液介質(zhì)下能產(chǎn)生平面形狀的電滲流。
由此,可使毛細(xì)管電泳具備如下優(yōu)點(diǎn):
(1) 高效 塔板數(shù)目在105-106 片/m 間,當(dāng)采用CGE 時(shí),塔板數(shù)目可達(dá)107 片/m 以上;
(2) 快速 一般在十幾分鐘內(nèi)完成分離;
(3) 微量 進(jìn)樣所需的樣品體積為nL 級;
(4) 多模式 可根據(jù)需要選用不同的分離模式且僅需一臺儀器;
(5) 經(jīng)濟(jì) 實(shí)驗(yàn)消耗不過幾毫升緩沖溶液,維持費(fèi)用很低;
(6) 自動(dòng) CE 是目前自動(dòng)化程度較高的分離方法。